HPLC色譜純?nèi)軇?/strong>與檢測(cè)器的匹配在使用紫外可見光檢測(cè)器時(shí),需選用無(wú)紫外吸收特性的溶劑作流動(dòng)相。樣品測(cè)定波長(zhǎng)應(yīng)當(dāng)在溶劑紫外吸收波長(zhǎng)上限以上,噪聲降至10-4~10-U,才能保證檢測(cè)的靈敏度,才能用于梯度洗脫。流動(dòng)相溶劑在整個(gè)梯度范圍內(nèi)互溶性要好,盡量減少溶劑折光指數(shù)對(duì)溶劑組成梯度的影響。
HPLC色譜純?nèi)軇?/strong>折光指數(shù)的改變會(huì)導(dǎo)致紫外吸收度的變化,使紫外檢測(cè)器產(chǎn)生噪音和漂移。因此,當(dāng)使用兩種或兩種以上溶劑做梯度時(shí),其折光指數(shù)應(yīng)該盡量接近,盡量減少溶劑紫外吸收度改變的影響。
在使用示差折光檢測(cè)器時(shí),應(yīng)使流動(dòng)相的折光指數(shù)與被測(cè)樣品的折光指數(shù)有盡可能大的差別,因?yàn)槎叩恼凵渎什顒e越大,檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)越大,檢測(cè)靈敏度越高。示差折光檢測(cè)器一般不用于梯度洗脫,這是因?yàn)殡S溶劑組成的改變,流動(dòng)相的折光指數(shù)也在改變,無(wú)法使基線穩(wěn)定。
使用熒光檢測(cè)器時(shí),不能使用可熄滅、抑制或吸收熒光的溶劑作流動(dòng)相。溶劑的極性和溶液的溫度對(duì)熒光強(qiáng)度有明顯的影響。增大溶劑的極性,導(dǎo)致熒光增強(qiáng)。通常熒光物質(zhì)溶液的熒光效率和熒光強(qiáng)隨著溫度的升高而降低。此外,當(dāng)樣品濃度較高時(shí),易引起熒光猝滅效應(yīng)和內(nèi)濾效應(yīng),溶液濃度越大,該效應(yīng)越顯著,溶液中的其它成分,特別是順磁性物質(zhì)的存在,將使猝滅效應(yīng)加劇。因此,在進(jìn)行熒光檢測(cè)時(shí),試樣要配成低于10-6g/mL濃度的溶液,要使用不含熒光物質(zhì)的溶劑。
HPLC色譜純?nèi)軇?/strong>儲(chǔ)存注意事項(xiàng):
儲(chǔ)存于陰涼、通風(fēng)的庫(kù)房。遠(yuǎn)離火種、熱源。庫(kù)溫不超過(guò)30℃,相對(duì)濕度不超過(guò)85%。保持容器密封。應(yīng)與氧化劑、堿類、活性金屬粉末分開存放,切忌混儲(chǔ)。配備相應(yīng)品種和數(shù)量的消防器材。儲(chǔ)區(qū)應(yīng)備有泄漏應(yīng)急處理設(shè)備和合適的收容材料。