柱層析填料是一種設(shè)計(jì)用于在病毒純化的捕獲和中度純化階段使用的層析填料。高載量與高流速和低反壓的結(jié)合降低了工藝周期時(shí)間并提高了產(chǎn)量。Capto家族系列由專門設(shè)計(jì)用于快速、有效和節(jié)約成本的純化的現(xiàn)代化工藝層析填料組成,符合現(xiàn)代大規(guī)模生物制藥和疫苗生產(chǎn)工藝的迫切需要。
柱層析填料主要包括常壓分離、減壓分離和加壓分離3種模式。常壓分離是簡單的分離模式方便、簡單,但是洗脫時(shí)間長。減壓分離盡管能節(jié)省填料的使用量,但是由于大量的空氣通過填料會(huì)使溶劑揮發(fā),并且有時(shí)在柱子外面會(huì)有水汽凝結(jié),以及有些易分解的化合物也難以得到,而且還必須同時(shí)使用水泵或真空泵抽氣。加壓分離可以加快淋洗劑的流動(dòng)速度,縮短樣品的洗脫時(shí)間,是一種比較好的方法,與常壓柱類似,只不過外加壓力使淋洗液更快洗脫。壓力的提供可以是壓縮空氣,雙連球或者小氣泵等。
柱層析填料操作的一些建議:
1、使用前首先明確自己的分離目的,即要做哪一方面的分離,從而選擇合適的凝膠填料,尤其對于沒有成熟工藝的學(xué)生和研發(fā)人員,請大家務(wù)必查閱文獻(xiàn)或者詢問老師,同時(shí)根據(jù)自己的分離要求,選擇合適長度和直徑的層析柱;
2、選擇好層析柱和填料以后,嚴(yán)格按照填料的要求來操作,包括填料的溶脹、脫氣、裝柱,期間務(wù)必嚴(yán)格按照說明書操作;
3、適當(dāng)控制上樣量,上樣以前務(wù)必要過0.22µm濾膜;
4、選擇合適的流動(dòng)相,根據(jù)膠的性質(zhì)決定能否用泵加壓;
7、使用完畢后,請將層析柱做好處理,將層析柱堵好,以防干膠或者進(jìn)氣泡,同時(shí)請做好試驗(yàn)紀(jì)錄,以便下一位同學(xué)用時(shí)方便查詢使用情況;
8、試驗(yàn)過程中所有用水或者溶液必須經(jīng)過抽濾和脫氣,嚴(yán)防氣泡;
9、若在使用過程中發(fā)生意外情況。