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用了這么久的毛細管柱,它的柱活性怎么樣?知道了柱活性的好處是什么?

更新時間:2022-11-09      點擊次數(shù):1019

毛細管柱是我們平時做氣相色譜分析*的重要耗材,毛細管柱分離性能的好壞直接影響我們實驗結(jié)果的合格率。

經(jīng)常使用毛細管柱的實驗小伙伴對于毛細管柱的型號應(yīng)該都不陌生吧,例如一款色譜柱CD-5MS,30m*0.25mm*0.25um,從這些描述中我們就能獲得色譜柱的固定相類型,長度,內(nèi)徑和膜厚。


01 我們常用的毛細管柱的型號有哪些呢?

一般從色譜柱的極性由弱到強我們常用的色譜柱包括-1、 -5、 -35、 -50、 -624、 -1701、 -WAX,他們的固定相分別是100%甲基聚硅氧烷、5%苯基-95%甲基聚硅氧烷、35%苯基-65%甲基聚硅氧烷、50%苯基-50%甲基聚硅氧烷、6%氰丙基苯基-94%甲基聚硅氧烷、14%氰丙基苯基-86%甲基聚硅氧烷、聚乙二醇20M。當(dāng)然現(xiàn)在也有越來越多的柱被大家所熟知,例如脂肪酸甲酯柱廣泛用來作為食品中脂肪酸的測試分析;血液中酒精檢測柱用來作為人的血液酒精分析等。另外還有-1MS、 -5MS、 -1HT、 -5HT的色譜柱,這些后端有MS、HT后綴的柱子,MS柱主要是流失更低適用于質(zhì)譜分析,能夠盡量降低離子源的污染,減少質(zhì)譜維護工作、HT柱溫度耐受更強,適用于檢測例如棕櫚酸等需要較高分離溫度的化合物檢測。

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02 針對這么多的色譜柱種類,如何去判斷和驗證這些色譜柱的性質(zhì)呢?

那就需要了解色譜柱型性能評價的理論知識。主要包括色譜柱的分離能力、極性以及色譜柱的柱活性。一般從這三個方面入手就能對色譜柱有充分的了解了。

色譜柱的分離能力主要包括塔板數(shù)、總分離效能、分離數(shù)和涂漬效率。塔板數(shù)大家都不陌生,是評價柱效的主要指標(biāo),有有效塔板數(shù)和理論塔板數(shù)之分??偡蛛x效能是指色譜柱在一定條件下對混合物的分離能力。一般以分離度來判斷。分離數(shù)是指在相鄰?fù)滴锓逯g可插入的組分峰的數(shù)目,也是指色譜柱的分離能力,是總分離效能的部分體現(xiàn)。涂漬效率和生產(chǎn)工藝有關(guān),是表征空柱柱效達到li想化的程度,一般非極性柱可以到90%以上,極性柱只能在60%-70%左右。

色譜柱極性的分析,現(xiàn)在大多用的是麥氏常數(shù)來表征色譜柱的極性。麥氏常數(shù)的檢測一般采用苯、正丁醇、2-戊酮、硝基丙烷、吡啶五種化合物,其中用苯作為電子給予體,正丁醇作為質(zhì)子給予體,2-戊酮代表定向偶極力,硝基丙烷代表電子接受體,吡啶代表質(zhì)子接受體。

色譜柱的柱活性可以用Grob測試液來進行分析,一次實驗便可以得到柱子的綜合性能信息。Grob測試液的物質(zhì)組成包括十二種物質(zhì):正十烷、正十一烷、正壬醛、正辛醇、2,3-丁二醇、2,6-二甲ji苯胺、2,6-二甲ji苯酚、二環(huán)己胺、乙基己酸、正十酸甲酯、正十一酸甲酯,正十二酸甲酯。柱效和分離數(shù)可以從正十烷、正十一烷、正十酸甲酯、正十一酸甲酯,正十二酸甲酯來獲得;檢測氫鍵可以從正辛醇來獲得;硅醇基的結(jié)果可以從正辛醇、2,3-丁二醇獲得;色譜柱的酸堿性可以通過2,6-二甲ji苯胺、2,6-二甲ji苯酚來判斷;二環(huán)己胺、乙基己酸主要考察色譜柱的不可逆吸附;正壬醛是用來分析氫鍵以外的醛吸附。此外Grob測試是有標(biāo)準化的測試條件,主要是色譜柱的柱流速和升溫速率根據(jù)載氣的不同有不同的要求。


Grob測試液不同型號的色譜柱有什么表現(xiàn)呢?

對比CD-5MS、CD-1701、CD-WAX三種由弱到強色譜柱的柱活性:

CD-5MS Grob測試結(jié)果

CD-1701 Grob測試結(jié)果

CD-WAX Grob測試結(jié)果

不同極性色譜柱對于Grob測試液的分離效果的差異有很多。

① 弱極性柱的出風(fēng)主要由沸點決定,xian是2,3-丁二醇,后流出是正十二酸甲酯。

② 類比CD-5MS和CD-1701可以看出CD-1701的出峰整體更靠后,氫鍵以外的醛的吸附較強因此峰高有所降低。對于低碳鏈的物質(zhì)來說沸點的影響較小,導(dǎo)致正十烷和正十一烷出峰較靠前。

③ 類比CD-5MS和CD-1701色譜柱,CD-WAX色譜柱由弱到強分離效果大的差異體現(xiàn)在物質(zhì)出峰位置的不同,因為CD-WAX柱的分離包含靜電力、誘導(dǎo)力、氫鍵作用力等,導(dǎo)致烷烴出峰靠前,丁二醇的出峰更靠后,乙基己酸的出峰也更靠后且理論板數(shù)提升較明顯。

④ 通過柱活性的測試,可以直觀發(fā)現(xiàn)CD-5MS適合分析烴類,苯系物等,CD-WAX適合分析羧酸類,醇類,酚類等,那么如果在不了解色譜柱的適用范圍時,可以用Grob測試液來測試出來柱活性,從而指導(dǎo)我們對實驗室不同活性樣品的分析,省掉很多彎路。

由三種不同極性的色譜柱分離效果的差異就有這么多的不同,更不用說分離數(shù)、柱子酸堿性和吸附分離性能。

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對于實驗室的色譜柱活性有所困惑的小伙伴,可以測試起來進行對比分析喲。


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